脂肪酸甲酯中游離甘油含量的測定是根據(jù)國標(biāo)GB/T28769-2012進(jìn)行的，根據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)，可以選擇上海密通SYP-28769脂肪酸甲酯中游離甘油含量試驗(yàn)器進(jìn)行測定。

警告:本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用可能涉及某些有危險性的材料、操作和設(shè)備,但并未對與此有關(guān)的所有安全問題都提出建議。用戶在使用本標(biāo)準(zhǔn)前有責(zé)任制定相應(yīng)的安全和防護(hù)措施,并確定相關(guān)規(guī)章限制的適用性。

1范圍

1.1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了采用氣相色譜法測定脂肪酸甲酯(FAME)中質(zhì)量分?jǐn)?shù)范圍為0.005%~0.07%的游離甘油含量的方法。

1.2本標(biāo)準(zhǔn)適用于評價純態(tài)生物柴油的脂肪酸甲酯的質(zhì)量。甘油作為酯交換反應(yīng)的副產(chǎn)物,其濃度會影響燃料的性能。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是bi不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修gai單)適用于本文件。

GB/T 4756石 油液體手工取樣法(GB/T 4756- -1998 ,eqv ISO 3170:1988)

GB/T 15687動植物油脂試樣 的制備(GB/T 15687- -2008 ,ISO 661 :2003 ,IDT) .

3術(shù)語和定義 ，

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

游離甘油含量free glycerol content

動植物油脂經(jīng)酯交換反應(yīng)并將甘油相分離后殘存于脂肪酸甲酯中的少量甘油。

4方法概要

將乙醇、水和正已烷及一定量的內(nèi)標(biāo)物加入到已知量的試樣中,使混合物形成兩相。游離甘油定量轉(zhuǎn)移至下層溶液中。采用氣相色譜法測定下層溶液以定量確定游離甘油的含量。

5試劑和材料

如非特別說明,所有試劑均為分析純。

5.1 正己烷。

5.2 1,4丁二醇 :純度不低于99%。

5.3 乙醇 :純度不低于95%。

5.4 甲酸:純度不低于 99%。

5.5甘 油:純度不低于99%。

5.6載氣:氦氣或氫氣,符合氣相色譜載氣要求,一 般純度不低于99. 99 %。

5.7輔 助氣體:

----氫氣:純度不低于99.99%,不含水和有機(jī)化合物;

----空氣:干燥空氣,不含有機(jī)化合物。

5.8 內(nèi)標(biāo)物溶液:在100 mL容量瓶中準(zhǔn)確稱量約80 mg(精確至0.1 mg)1,4-丁二醇,用少量蒸餾水溶解,加入1mL甲酸,用蒸餾水稀釋至刻度。按此步驟制備的溶液在室溫下可以穩(wěn)定存放24h。

6儀器

6.1 具備有下列配置的氣相色譜儀。

6.1.1色譜柱箱 :設(shè)定溫度的控制精度為士1 C。

6.1.2進(jìn)樣口 :分流/無分流進(jìn)樣口或填充柱進(jìn)樣口。

6.1.3火焰離子化檢測器(FID)及信號轉(zhuǎn)換/放大系統(tǒng)。

6.1.4 記錄儀/積分儀:能夠與信號轉(zhuǎn)換/放大系統(tǒng)連接使用，最大響應(yīng)時間小于1 s,繪圖速度可以調(diào)節(jié)。

6.1.5毛細(xì)管 色譜柱:類型為PoraPLOT Q,長度10 m,內(nèi)徑0.32 mm,液膜厚度10 靘(見注),或采用固定相為CHROMOSORB 101,內(nèi)徑4 mm,長度1 m的填充柱。采用的色譜柱應(yīng)滿足甘油和內(nèi)標(biāo)物的色譜峰*分離(兩色譜峰之間的基線接近零點(diǎn)),分析時間小于15 min,并且按照9.3測定得到的甘油的校正因子不超過2.5。

注:已注意到不同生產(chǎn)商所提供的毛細(xì)管色譜柱的性能存在差別,有些在使用中會帶來一些問題。有人提出使用游離脂肪酸分析用固定相(FFAP)或聚乙二醇固定相的毛細(xì)管色譜柱。無論使用何種類型色譜柱,其分離效果需滿足指標(biāo)要求。

6.1.6流量控制器,用于載氣和輔助氣流量控制。

6.2氣相色 譜用微量注射器:5 ul或10 ul。

6.3 容量瓶:50 mL和100 mL。

6.4 移液管:1 mL。

6.5帶刻度移液管 :5 mL。

6.6分析天平:感量0.1 mg。

6.7玻璃錐形離心試管:10mL。

6.8離心機(jī):轉(zhuǎn)速可達(dá)到2000r/min。

7取樣

7.1按照GB/T4756的方法取樣。

7.2取樣過程應(yīng)考慮到脂肪酸甲酯中的游離甘油與玻璃容器有很強(qiáng)的親和性,因此應(yīng)避免使用玻璃容器收集和儲存樣品,可使用合適的塑料容器。

8試樣制備

按照GB/T15687的要求準(zhǔn)備試樣。試樣不能加熱或過濾。

9操作步驟

9.1 色譜條件

9.1.1毛細(xì)管 柱可使用下列條件:

-----不分流模式:

a)色譜柱箱溫度 :初溫150 C,保持1 min,升溫速率40 C/min,終溫210 C,保持12 min;

b) 進(jìn)樣口溫度:250 °C;

c) 檢測器溫度:250 C;

d) 進(jìn)樣0.5 min后打開分流閥，分流比約20: 1;

e)載氣流量:3 mL/ min。

------分流模式:

a)色譜柱箱溫度:210 C;

b) 進(jìn)樣口溫度:230 C;

c) 檢測器溫度:250 C;

d)分流比:約 50: 1;

e) 載氣流量:1 mL/ min~2 mL/ min.

9.1.2填充柱可使用下列 條件:

----色譜柱箱溫度:200 C;

-----進(jìn)樣口溫度:230 °C;

-----檢測器溫度:250°C;

------載氣流量:20 mL/ min~30 mL/ min。

注:推薦采用毛細(xì)管柱的不分流進(jìn)樣模式色譜條件,以保證測定的靈敏度。

9.2色譜峰定性

根據(jù)相同條件下甘油和內(nèi)標(biāo)物的保留時間可以確定試樣中甘油和內(nèi)標(biāo)物的色譜峰。圖1為典型色譜圖。

9.3甘油校正因子的測定

準(zhǔn)確稱量約100 mg(精確至0. 1 mg)甘油和100 mg(精確至0.1 mg)1,4-丁二醇于100 mL容量瓶中,加入50mL乙醇(見5.3)溶解,并用蒸餾水稀釋至刻度。配制過程中注意水/醇混合時的放熱效應(yīng)和體積的減少。取1霯此混合溶液注人色譜系統(tǒng)并按照前述色譜條件進(jìn)行分析,至少平行測定三次，計算甘油的校正因子。該溶液在室溫下可以穩(wěn)定儲存幾周。根據(jù)色譜圖結(jié)果和式(1)計算甘油的校正

因子Fr:

式中:

A1 ------1,4-丁二醇峰面積;

A2 -----甘油峰面積;

M1-----溶液中1,4-丁二醇的質(zhì)量, 單位為毫克(mg);

M2------溶液中甘油的質(zhì)量,單位為毫克(mg)。

按照式(2)計算的甘油校正因子F,應(yīng)不超過2.5(見6. 1.5中注)。

9.4定量分析

9.4.1 試樣準(zhǔn)備

稱量約3.5 g(精確至0.1 mg)試樣(約4 mL)于10 mL離心試管中,加人1 mL乙醇(見5.3),輕輕

振搖使混合均勻。準(zhǔn)確加入1 mL內(nèi)標(biāo)物溶液(見5.8)和4 mL正已烷,蓋緊試管塞并劇烈振蕩5 min。離心分離15 min。取下層溶液進(jìn)行色譜分析。

9.4.2色譜分析

用微量注射器取約1 霯下層溶液,然后抽人一定量的空氣使針頭中無溶液滯留(“熱針"技術(shù)),仔細(xì)將注射器及針頭用紙巾擦拭干凈,將注射器針頭通過隔墊插人進(jìn)樣口,等待5s,快速將試樣注人汽化室,5s后拔出進(jìn)樣針頭。在色譜圖上標(biāo)記進(jìn)樣時間,甘油色譜峰流出后繼續(xù)幾分鐘。

10 計算和報告

根據(jù)積分結(jié)果計算試樣中的游離甘油的含量。游離甘油的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w(%)按式(2)計算:

式中:

A1、A2、Fr-----與式(1)中含 義相同;

M1----試樣中加入的1,4丁二醇的質(zhì)量,單位為毫克(mg);

M2----試樣的質(zhì)量,單位為毫克(mg)。

結(jié)果以質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)表示,精確至小數(shù)點(diǎn)后第2位。

11 精密度

11.1實(shí)驗(yàn)室間精密度詳細(xì)測定數(shù)據(jù)見附錄A。據(jù)此得出的精密度值不適用于超出所列試樣類型和濃度范圍的試樣測試。按照下述規(guī)定判斷試驗(yàn)結(jié)果的可靠性(95%置信水平)。

11.2 重復(fù)性(r)

同一實(shí)驗(yàn)室同-操作人員、采用同一儀器設(shè)備,在相同的實(shí)驗(yàn)條件下,對同一-試樣兩次重復(fù)測定結(jié)果之差不應(yīng)超過表1中重復(fù)性(r)的值。

11.3 再現(xiàn)性(R)

不同實(shí)驗(yàn)室、不同操作人員、采用不同儀器,對同一試樣兩個單一和獨(dú)立測定結(jié)果之差的絕對值,不應(yīng)超過表1中再現(xiàn)性(R)的值。

表1測定重復(fù)性和再現(xiàn)性(r和R)

12 試驗(yàn)報告

試驗(yàn)報告應(yīng)注明:

----識別試樣的必要信息;

----所用采樣方法;

----分析方法及標(biāo)準(zhǔn)號;

----本標(biāo)準(zhǔn)未列出的操作細(xì)節(jié)，以及有可能影響分析結(jié)果的其他因素;

----測定結(jié)果(見第 10章)。

附錄A

(資料性附錄)

實(shí)驗(yàn)室間試驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)室協(xié)作試驗(yàn)涉及歐洲范圍5個國家7個實(shí)驗(yàn)室對5個試樣的分析結(jié)果。

試樣1:由葵花籽油制備的脂肪酸甲酯。

試樣2:由菜籽油制備的脂肪酸甲酯1。

試樣3:由菜籽油和葵花籽油混合制備的脂肪酸甲酯(75:25)。

試樣4:由菜籽油制備的脂肪酸甲酯2。

試樣5:由菜籽油和葵花籽油混合制備的脂肪酸甲酯(25:75)。

本試驗(yàn)項(xiàng)目由歐洲標(biāo)準(zhǔn)化委員會CEN/TC307/WG1工作組于1999年組織進(jìn)行,獲得的試驗(yàn)結(jié)果按照ISO 4259的要求進(jìn)行統(tǒng)計分析,得到的精密度數(shù)據(jù)見表A.1。